八零未代王子传奇

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市场论述(2/2)

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形成两个细胞,一个是生殖细胞,一个是营养细胞。生殖细胞将再分裂一次,形成两个精子。

二产生花粉植株的两种途径,通过花药培养产生花粉植株(即单体植株)一般有两种途径(图3~7),一种是花粉通过胚状体段发育为植株,另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织,再将其诱导分化成植株。这两种途径之间并没有绝对的界限,主要取决培养基中激素的种类及其浓度配比。

人们一直以为,植物细胞的离体培养只能通过分别诱导芽和根等器官再发育成植株,20世纪50年代未,科学家在胡萝卜根组织的单细胞悬浮培养液中发现,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,它的发育过程也与合子胚类似,胚芽,胚根,胚轴等结构完整,就像一颗种子。科学家将这种结构称做体细胞胚(byoid)。除了植物的体细胞外,由单倍体细胞产生的花粉胚,也可发育成为单倍体植株。

影响花药培养的因素,诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低,受多种因素影响,其中,材料的选择与培养基的组成是主要的影响因素。

不同植物的诱导成功率很不相同,就同一种植物来说,亲体植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响。花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般月季花的花药培养时间选在五月初到五月中旬,即月季的初花期。选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。这是因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体,在花粉发育的过程中,只有某一个时期对离体剌激敏感。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期。花药培培养成功率最高。选择单核期以前的花药接种,质地幼嫩,极易破碎:选择单核期以后的花药接种,花瓣已有些松动,又给材料的消毒带来困难。为了挑选到单核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾(图3~8)。盛开的或略微开放的花(图3~9),都不宜先作实验材料。此外,亲本植株生长条件,材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功率都有一定的影响。

材料的选取,选择花药时,一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期,确定花粉发育时期的最常用的方法有醋酸洋红法。但是,某些植物的花粉细胞核不容易着色,需采用焙花青—铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。醋酸洋红法,将花药放在载玻片上,加一滴质量分数为1的醋酸洋红,用镊柄将花药捣碎,盖上盖玻片后在显微镜下检查。醋酸洋红的配制方法是:将体积分数为45的醋酸100洋红,再加热回流(回流装置参见专题课2)8h,冷却至50度,过滤即可。

焙花青—铬矾法,花药应先在卡诺氏固定液中固定20myn,然后取出放在载玻片上,加焙花青—铬矾溶液染色,盖上盖玻片后在显微镜一检查。卡诺氏固定液的配制方法是:将无水酒精与冰醋酸按体积比例为3:1的比成混匀。焙花青——铬矾溶液的配制方法是:将5g铬钾矾{k2r2(l蒸馏水中,溶解后加入0。1g焙花青,混匀并加热至沸腾,煮沸5myn后冷却至室温,过滤,加蒸馏水定容至100ml。

材料的消毒,通常先将花蕾用体积分数为70的酒精浸泡大约30s,立即取出,在无菌水中清洗。取出后再用无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分,放入质量分数为0。1的氯化汞溶液中2~4min(也可以用质量分数为1的次氯酸钙溶液或饱和漂淀粉溶液)取出后再用无菌水冲洗3~5次。

接种和培养,灭菌后的花蕾,要在无菌条件下除去萼片和花瓣,并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时,要尽量不损伤花药(否则接种后容易从受伤部分产生愈伤组织),同时,还要彻底去除花丝,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。

通常每瓶接种花药7`10个,培养温度控制在25度左右,不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。一般经过20~30天d培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组织或形成胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上,以便进一步分化出再生植株。如果花药开裂释放出胚状体,则一个花药内就会产生大量幼小植株,必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开,分别移植到新的培养基上,否则这些植株将很难分开。

在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植树株,染色体组织数目常常会发生变化。因此还需要对培养出来的植株作进一步的签定和筛选选。今天就讲到这里,下课。”于是陈跃进就拿起教案往教室门外走出去。

可是同学们听到下课了,都开心了,一时间,教室将是熙熙攘攘,调皮的男生就互相扯皮捣蛋,女生就带着微笑,往教室门外走出去方便。于是,走廊里,洗手间,到处都是男生跟女生的身影,是来也匆匆去冲冲。

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