除了上述因素外，ph温度，光照等条件也很重要。不同的植物对各种条件的要求往往不同，进行菊花的组织培养，一般将在ph控制在5~8左右，温度控制在18~22度，并且每日用日光灯照射12s培养基含有20多种营养成分，实验室一般使用4度保存的配制好的培养基液来制备，具体操作如下：一配备各种母液，配制母液时，无机物中大元量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍（ms培养基的配方参见附录图3），常温保存。激素类，维生素类以及用量较小的有机物一般可按1l的质量浓度单独配制成母液，用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。
二配制培养基，配制1l蒸馏水，加热使琼脂熔化，然后加入蔗糖30g，取配制好的大量元素，微量元素，有机物和植物激素的母液，依次加入，加蒸馏水定容至1000ml，调节l或100ml，由于菊花茎段的组织培养比较容易。因此，不必添加植物激素。如果有兴趣，你也可以试着添加一些激素。
三灭菌，将分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌。首先选取菊花茎段时，要取生长旺盛的嫩枝，菊花茎段用水冲冼后可加少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在水流下冲洗20min左右。用无菌吸水低吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70的酒精中摇动2~3次，持续6~7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗。取出后仍用无菌吸水纸吸干外植体表面水分，放入质量分数为0。1的氯化汞溶液中1~2myn。取出后，在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液。
接种，接种前用体积分数为70的酒精将工作台擦拭一遍，工作台消毒后，首先点燃酒精灯。此后，所有的接种操作都必须在酒精灯旁进行，并且每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌。将装有培养基的锥形瓶整齐地排列在酒精灯左侧。将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿中切成小段（长约0。5~1cm）。左手持锥形瓶，右手拉开捆扎锥形瓶的绳子，并将封口膜攥于右手手心，以避免封口膜接触瓶口的一面被污染。左手持瓶，使瓶口旋转通过火焰：右手用镊子夹取菊花茎段，插入培养基中（图3~3）插入时应注意方向，不要倒插。每瓶接种6~8块外植体，接种后，将封口膜重新扎好。
培养，接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒。培养温度控控制在18~22度，并且每日用日光灯光照12h。
移栽，在移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培培养间生长几天。然后用水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼长壮后再移栽到土壤中（图3~4）。
栽培，将幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗生长情况（图3~4），适时浇水，施肥，直至开花。但是管理很重要，接种3~4天后，观察外植体的生长情况，统计有多少外植体被污染，有多少能正常生长。分析外植体被污染的原因。
比如说你培养出愈伤组织了吗？从接种到长出愈伤组织经历了多少天？你培养出愈伤组织进一步分化出根和芽了吗？两周后观察茎段的分化情况，填好结果记录表，并及时分析结果。幼苗移栽到露地后，能够正常生长吗？一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养，如芦荟，豆辩绿，秋海棠，月季等。你可以从挑选一种你喜欢的植物，进行组织培养。
如果你对植物激素的作用感兴趣的话，可以在查阅资料的基础上，探究生长素与细胞分裂素的使用比例对植物组织培养的影响。例如，你可以设计一组对照实验，分别探究不加任何植物激素，生长素用量与细胞分裂素用量的比值为1，比值大于1以及比值小于1时，对实验结果的影响。
接着给同学们说月季的花药培养，还是先说课题背景，1964年，印度科学家在培养毛叶曼陀罗的花药时。首次获得了由花药中的花粉粒发育而来的单倍体植株。这个实验说明殖细胞和体细胞一样，在离体条件下也具有发育成完整植株的潜能。自20世纪60年代以来，花药培养的研究发展迅速。据记载，世界上已有250多种高等植物的花药培养获得成功，其中小麦，玉米，大豆，甘蔗和橡胶等近50种植物的花粉再生植株已由我国科技人员首先培育成功。植物的花药培养在育种上有特殊的意义。育种工作者可以采用花药培养的方法，使花粉粒发育为单倍体植株，再经过人工诱导使染色体数目加倍。重新恢复到正常植株的染色体数目。这样的植株不仅能够正常生殖，而且每对染色体上的成对的基因都是纯合的。自交生产的后代不会产生性状分离。单倍体育种不仅缩短了育种周期，也为新品种的培育开辟了新途径。在体课题中，我们将尝试月季的花药培养。
一被子植物的花粉发育，被子植物的雄蕊通常包含花丝，花药两部分。花药为囊状结构，内部含有许多花粉，花粉是由花母细胞经过减数分裂而成形的。因此，花粉是单倍体的生殖细胞。被子植物花粉的发育要经历小孢子四分体期时期，4个单倍体细胞连在一起，进入单核期时，四分体的四个单倍体细胞彼此分离。形成4个具有单细胞核的花粉粒。这时的细胞含浓厚的原生质，核位于细胞的中央（单核靠边期），并分裂成1个生殖细胞的中央移向细胞核，进而形
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